best365官网登录,best365官网登录,beat365登录入口

欢迎您访问武汉best365官网登录 科技有限公司官方网站!
站点地图 服务热线:400-6800-868
  • 产品
  • 文章

AGENT BRAND

品牌专题

当前位置:首页 > 品牌专题

Biotium:荧光素酶检测相关问题及检测工具

发布者:best365官网登录 科技    发布时间:2023-04-28     
分享到:

第一次做荧光素酶检测实验的小伙伴,可能会面临很多的问题。那么,究竟如何入门该实验,您又有哪些需要注意的问题了?今天小艾带您来一探究竟。


luciferase.png

  1. 什么是萤光素/萤光素酶检测?它如何起作用?

在自然界中,当化学能转化为光能时,就会发生生物发光。萤火虫,真菌和海洋生物等许多生物都出于多种原因出现生物发光。当萤光素酶催化萤光素的氧化导致发光时,就会发生该过程。反应机理如下图所示:


 

  1. 萤光素酶检测的主要用途是什么?

萤光素酶是检测启动子强度和活性的好方法。例如,如果您想研究启动子区域内的转录,可以将荧光素酶基因置于启动子后面。转录该基因后,您将根据产生的荧光强度知道自己是否具有强大的启动子。检测中产生更强的荧光意味着更多的荧光素酶被转录,这意味着您具有更强的启动子。 您也可能会遇到的另一个问题是,如果要检测基因表达,何时选择荧光素酶测定法,何时选择qPCR。要记住的是:qPCR方法将测量基因的转录本。它不会告诉您转录的控制。但是,使用萤光素酶可以测量启动子的和转录调控。还要考虑的另一件事是,您想要研究基因调控的深度。您可能会发现,必须同时执行这两种技术才能了解项目的主要方面。  


  1. 我需要怎么进行荧光素酶检测?

领域研究类型试剂仪器孔板/管
生物光学成像细胞、活体动物(如:小鼠)荧光素酶检测试剂/荧光素酶检测试剂盒酶标仪/单管发光仪微孔板/微量离心管


注:1.试剂:您可以选择一个试剂盒来进行实验,它会包含您需要的所有必要成分;您也可以选择试剂,再配制或购买其他实验中的必要成分。如果您购买的是单独的产品,那么我们建议您考虑质量,尤其是在荧光素方面。纯度的差异会产生影响。试剂盒具有相当大的便利性,例如,您不必制作缓冲液,因为试剂盒中已经提供了它。制备萤光素储液时,无需称量,因为您的萤光素已经过测量。它还在您的实验设置中提供了统一性2.仪器:首先检查您的仪器是酶标仪还是单管发光检测仪,确认您的仪器是否带有进样器。同时取人您的仪器在什么波长下工作以及在什么温度下工作。所有这些都将帮助您进一步规划实验。(酶标仪可以读取孔板中的样品。通常范围在96到384孔之间;单管发光检测仪,将读取单个微量离心管。)3.孔板/管:对于这种测定类型,必须使用平底的板(不要使用圆底或者V型底的孔板)。它们是专门为光学检查和细胞培养应用而设计的。透明的孔板使您可以看到裂解物,但缺点是相邻的孔中的背景可能会影响您的观察。白色的孔板可以防止出现这种背景。但是看不到自己的裂解物。底部透明的白板可以解决可见性和背景问题。



  1. 萤光素酶检测推荐步骤:

首先需要确认您是进行双重报告基因检测还是单个报告基因检测。荧光素酶检测的建议步骤如下:

a. 选择荧光素酶报道基因(萤火虫荧光素酶或海肾荧光素酶等)。如果要进行双重报告基因检测,则萤光素酶需要进行不同的光谱检查。 b. 将报告基因克隆到质粒中。如果您要进行双重报告基因检测,则将其他报告基因克隆到单独的质粒中。 c. 将质粒与实验细胞共转染。 d. 经过24至48小时培养后,取出培养基并裂解细胞。 e. 将包含萤光素的缓冲液添加到裂解物中,使用酶标仪进行检测


上述步骤是建议的一般步骤,实际情况应根据具体的分析类型和实验设计,对实验方法进行相应的调整。  


Biotium荧光素酶检测相关产品推荐:  


Biotium.png

更多详情请参见:


看到这儿,您心动了吗?马上联系小艾吧! 

best365官网登录分类
  • 高品质保障 先进的生产研发技术
  • 高性价比 价宜质优,性价比高
  • 高效省心 从购买到使用,放心无忧
  • 安全运输 完善的保护措施安全运输

微信扫码在线客服

微信咨询

全国免费技术支持

400-6800-868

在线客服